鼻息肉成纤维细胞在常氧与低氧环境下的原代培养及鉴定

　　近日，山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉科研究人员发表论文，旨在探讨鼻息肉成纤维细胞在常氧与低氧环境下的原代培养及鉴定，以备后续研究其生物学特性。研究指出，dispaseⅡ酶消化的细胞数目较多，是一种较好的获得细胞的方法。在常氧及低氧条件下均可建立稳定、可靠的人鼻黏膜成纤维细胞原代培养模型，可为鼻息肉的相关研究提供良好的细胞系。该文发表在2014年第02期《山东大学耳鼻喉眼学报》杂志上。

　　取2012至2013年行鼻内镜下鼻息肉切除的息肉组织20例。标本放入4℃无菌的PBS溶液中，在超净台中反复冲洗、浸泡，剪成1～2 mm大的组织块后，分成2份转入EP管中，分别用0.1%Ⅰ型胶原酶和1 mL的dispaseⅡ酶消化过夜。次日取出，轻轻吹打，进行计数后，加入培养液（DMEM+10%胎牛血清+1×105U/L青霉素+100 mg/L链霉素），分别置于常氧、低氧条件下培养（常氧培养以空气作为混合气体，氧体积分数约为20%；低氧培养则以氮气作为混合气体，调节氧体积分数为5%。二者其他培养条件相同，均为37℃、含体积分数为5%的CO2和饱和湿度）。在倒置相差显微镜下观察细胞的形态、增殖及生长状况、有无污染。用CCK-8比色法检测细胞的增殖，描绘生长曲线。

　　dispaseⅡ酶消化组的细胞数目高于Ⅰ型胶原酶消化组，两组之间差异有统计学意义（P<0.05）。鼻息肉成纤维细胞在常氧及低氧条件下培养的生长曲线无明显差异。