microRNA-374b抑制乳腺恶性肿瘤细胞增殖和转移的作用机制

　　近期，上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院超声科研究人员发表论文，旨在探讨microRNA-374b抑制乳腺恶性肿瘤细胞增殖和转移的作用机制。研究指出，microRNA-374b可通过抑制MCP-1的表达来抑制乳腺恶性肿瘤细胞的增殖和转移能力，并促进其凋亡。该文发表在2015年第02期《上海医学》杂志上。

　　构建microRNA-374b过表达的稳转MDA-MB-231细胞和空载MDA-MB-231细胞。通过MTS细胞增殖实验、单克隆形成实验、细胞划痕实验和细胞凋亡检测，计算细胞增殖相对数、划痕修复百分比和细胞凋亡百分比。通过microRNAs专业网站的预测筛选和双荧光素实验分析其可能的下游基因。采用实时定量PCR检测乳腺癌组织和癌周组织中人单核粒细胞趋化因子（MCP）-1和microRNA-374b含量。

　　乳腺癌组织中的microRNA-374b相对表达量为0.43±0.03，显著低于癌周组织中的1.15±0.04（P<0.05）。MDA-MB-231-2396细胞的microRNA-374b相对表达量为0.53±0.20，显著高于MDA-MB-231-NC细胞的0.18±0.02（P<0.05）。培养第5、7天时MDA-MB-231-2396细胞增殖相对数分别为9.00±0.74、16.06±0.23，显著低于MDAMB-231-NC细胞的14.23±0.55、31.92±2.56（P值均<0.05）。MDA-MB-231-2396细胞结晶紫洗脱液的光密度值为0.54±0.02，显著低于MDA-MB-231-NC细胞的1.35±0.05（P<0.05）。MDA-MB-231-2396细胞早期凋亡百分比为（44.92±1.56）%，显著高于MDA-MB-232-NC细胞的（2.60±0.04）%（P<0.05）。MDA-MB-231-2396细胞于培养16、24、48h时的划痕修复百分比分别为（13.27±5.72）%、（18.25±8.43）%、（28.22±9.46）%，均显著低于MDA-MB-232-NC细胞的（25.48±0.53）%、（47.35%±1.40）%、（80.23±2.61）%（P值均<0.05）。双荧光素实验结果显示，MCP-1 3’UTR野生型与microRNA-374b类似物组合转染入293T细胞后两种荧光素的比例显著低于MCP-1 3’UTR突变型与microRNA-374b类似物组合（P<0.05），MCP-1 3’UTR野生型与microRNA-374b抑制物组合转染入293T细胞后两种荧光素的比例显著高于MCP-1 3’UTR突变型分别与microRNA抑制物的对照物、microRNA-374b、microRNA-374b类似物的对照物组合（P值均<0.05）。乳腺癌组织中MCP-1的相对表达量为5.79±1.32，显著高于癌周组织的0.07±0.01（P<0.05）。