鞣酸通过下调TMEM16A的表达抑制人结肠癌细胞SW620细胞的增殖

　　近日，重庆医科大学附属第一医院麻醉科研究人员发表论文，旨在探讨鞣酸对人结肠癌SW620细胞增殖及TMEM16A mRNA与蛋白水平的影响。研究指出，鞣酸能明显抑制人结肠癌细胞SW620细胞的增殖，将其细胞周期阻滞于G1～S期，并下调TMEM16A的mRNA及蛋白水平。该文发表在2014年第01期《重庆医学》杂志上。

　　将对数生长期的人结肠癌细胞SW620分为3组，分别是鞣酸低剂量组（50μmol/L）及高剂量组（100μmol/L），以及二甲基亚砜（DMSO）作为空白对照组，培养48、72h。MTT法检测细胞的增殖情况，流式细胞仪测定细胞周期的分布及凋亡情况，RT-PCR和Western blot分别检测TMEM16A的mRNA水平和蛋白水平。计量资料采用x±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK检验。

　　MTT结果显示：鞣酸处理能显著抑制SW620的增殖。高剂量组对SW620细胞的抑制作用比低剂量大。处理48h，高剂量组比低剂量组抑制作用明显（t=15.35，P<0.01）；处理72h，高剂量组同样比低剂量组抑制作用明显（t=22.32，P<0.01）。流式细胞检测结果显示：与对照组相比，各个剂量组都能显著将SW620细胞抑制在G0/G1期和S期（F=6 782.1、1 509.3，P<0.01），G2/M期的细胞比例差异无统计学意义（F=1.37，P>0.05）。各个剂量组处理后，凋亡率差异有统计学意义（F=545.3，P<0.01）。与对照组比较，鞣酸高剂量组的3H-TdR、3H-Leucine掺入量在48、72h均明显低于对照组（P<0.05）。鞣酸低剂量组药物干预48、72h后TMEM16A mRNA相对表达量分别为0.63±0.01和0.62±0.01；鞣酸高剂量组药物干预48、72hTMEM16A mRNA相对表达量分别为0.58±0.01和0.50±0.01，均低于空白对照组的0.85±0.01（F=7.645，P<0.05）。鞣酸低剂量组药物干预48、72h后TMEM16A蛋白相对表达量分别为0.68±0.14和0.65±0.12；鞣酸高剂量组药物干预48、72hTMEM16蛋白相对表达量分别为0.64±0.15和0.63±0.11，低于空白对照组的1.28±0.06（F=4.508，P<0.05）。