Skp2反义寡核苷酸对大肠癌细胞SW480生长和增殖的影响

　　近日，武警重庆总队医院甲乳血管外科研究人员发表论文，旨在研究S期激酶相关蛋白2反义寡核苷酸（Skp2antisense oligodeoxynucleotide，Skp2ASODN）对大肠癌细胞生长和增殖的影响及可能机制。研究指出，Skp2ASODN对SW480细胞的生长和增殖具有抑制作用。其可能的机制为通过Skp2ASODN的基因封闭作用，降低了Skp2对P27kip1泛素化降解作用，从而阻滞细胞周期进行。该文发表在2014年第03期《重庆医学》杂志上。

　　采用脂质体介导不同浓度的Skp2ASODN转染SW480细胞，终浓度分别设置0.050、0.125、0.250、0.500、1.000、2.000、4.000μmol/L，以Skp2无义寡核苷酸（NSODN）及空白组作对照。采用倒置显微镜观察、噻唑蓝比色法（MTT）和流式细胞术（FCM），观察不同浓度的Skp2ASODN对SW480细胞生长、增殖和细胞周期的影响。运用RTPCR和免疫细胞化学检测SW480细胞中Skp2、P27kip1 mRNA和蛋白表达情况。

　　倒置显微镜下观察见SW480细胞形态未见改变，生长速度减慢。Skp2ASODN浓度达到0.125μmol/L时，抑制率为14.48%（P<0.05）。随着Skp2ASODN浓度增加，其对SW480细胞的生长和增殖的抑制作用增强（P<0.01），并存在浓度依赖效应。SW480细胞G0/G1期增多（P<0.01），S期减少（P<0.05），细胞周期进程受到阻滞。RT-PCR及免疫细胞化学显示：Skp2mRNA及Skp2蛋白表达降低（P<0.05），P27kip1mRNA未见改变（P>0.05），但其蛋白表达明显升高（P<0.01）。