生长因子受体结合蛋白-2抑制肠癌细胞HT29增殖

　　近日，福建医科大学研究生教育学院研究人员发表论文，旨在研究Grb2 shRNA转染对肠癌细胞HT29增殖相关信号通路的影响，探讨以Grb2为肠癌治疗靶点的可行性。研究指出，在HT29细胞，Grb2 mRNA和蛋白水平上明显抑制，可诱导HT29细胞增殖和相关信号传导通路分子表达下调。该文发表在《基础医学与临床》2013年第33卷第9期上。

　　应用shRNA慢病毒质粒系统，将Grb2 shRNA转染至293T细胞，获得5株不同序列Grb2 shRNA慢病毒颗粒，并感染肠癌HT29细胞，分别获得的5株感染Grb2 shRNA慢病毒颗粒的肠癌HT29细胞系为实验组(即感染Grb2 shRNA的细胞HT29/shGrb2-69、HT29/shGrb2-70、HT29/shGrb2-71、HT29/shGrb2-72、HT29/shGrb2-73)，以eGFP shRNA慢病毒感染肠癌HT29细胞为阴性对照组。MTT法检测细胞增殖情况，RT-PCR检测Grb2 mRNA表达，Western blot检测Grb2、P42/44 ERK、磷酸化P42/44 ERK、Akt、磷酸化Akt(P-Akt)和STAT5等信号通路分子表达的改变。

　　感染shGrb2病毒72 h，HT29/shGrb2-69、HT29/shGrb2-73两株细胞在mRNA和蛋白水平均出现抑制现象。HT29/shGrb2-69、HT29/shGrb2-73细胞在感染后24h A值分别为0.176±0.045，0.186±0.013，感染48 h后为0.347±0.048、0.382±0.041均显著高于空白对照、阴性对照(P ＜0.001)，72 h为0.934±0.038、0.983±0.205高于空白对照、阴性对照(P＜0.01)；感染后72 h，phospho-P42/44 ERK、Akt、phospho-Akt明显下降，而ERK、STAT5表达不受影响。