癌胚抗原启动子驱动双自杀基因对裸鼠大肠癌移植瘤的作用

　　近日，厦门大学附属第一医院厦门市肿瘤中心肿瘤外科研究人员发表论文，旨在探讨癌胚抗原启动子(Cp)驱动的双自杀基因系统Cp-CDglyTK对裸鼠大肠癌移植瘤的治疗作用。研究指出，Cp-CDglyTK在荷瘤裸鼠体内通过脂质体的介导，能靶向作用于癌胚抗原阳性的大肠癌细胞，并通过前体药物显著抑制裸鼠大肠癌移植瘤。该文发表在《中华医学杂志》2013年第93卷第28期上。

　　pcDNA3.1(-)Cp-CDglyTK质粒转染癌胚抗原阳性的SW480细胞和癌胚抗原阴性的HeLa细胞，反转录PCR检测目的基因的表达；给予不同浓度的前体药物5氟胞嘧啶(5-FC)及更昔洛韦(GCV)处理，用四甲基偶氮唑盐(MTT)法评估杀伤效应和旁观者效应。96只裸鼠在右侧腋窝皮下移植SW480细胞，72只移植HeLa细胞，建立大肠癌移植瘤模型。前体药物治疗实验中，取SW480和HeLa移植瘤裸鼠各48只，各分4组(Ⅰ～Ⅳ，Ⅴ～Ⅷ组，n=12)，分别瘤体注射磷酸盐缓冲液(PBS)、GCV联合5-FC，腹腔注射PBS、GCV联合5-FC。自杀基因联合前体药物治疗实验中，余下48只SW480移植瘤裸鼠分为Ⅸ～Ⅻ组(n=12)，24只HeLa移植瘤裸鼠分为ⅩⅢ～ⅩⅣ组(n=12)，均经瘤体注射脂质体Lipofectamine(R)和质粒Cp-CDglyTK，再由腹腔注射药物(Ⅸ组:PBS，Ⅹ组GCV，Ⅺ组:5-FC，Ⅻ组:GCV联合5-FC，Ⅻ组:PBS，ⅩⅣ组:GCV联合5-FC)。记录肿瘤体积、最终肿瘤重量和生存时间，比较分析各组裸鼠的治疗效果。

　　转染质粒的SW480细胞有CDglyTK基因的表达，GCV联合5-FC对转染质粒的SW480细胞的抑制率(59.87％±0.21％)明显高于HeLa细胞(9.90％±0.09％，P＜0.01)，GCV与5-FC联合用药对转染质粒的SW480细胞的生长抑制率和旁观者效应大于单一使用GCV或5-FC(均P＜0.05)。Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅷ组分别与对照组Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ组比较，肿瘤体积、最终瘤重和生存期差异均无统计学意义(均P ＞0.05)。Ⅻ组最终肿瘤体积和最终瘤重均小于Ⅸ组、Ⅹ组和Ⅺ组[(150.0±3.2)比(522.5±1.9)、(256.8±10.4)和(260.7±2.2)mm3，(54.1±10.4)比(682.0±12.0)、(251.8±15.1)和(271.6±17.7) mg，均P＜0.05]；Ⅻ组的肿瘤生长抑制率和生存时间大于Ⅹ组和Ⅺ组[92.1％比63.1％、60.2％，(25.7±0.8)比(21.8±0.5)、(18.0±0.9)d，均P＜0.05]。ⅩⅣ和ⅩⅢ组肿瘤体积、最终瘤重和生存时间差异均无统计学意义(均P＞0.05)，ⅩⅣ组的肿瘤生长抑制率仅为0.9％。