mPEG-CS纳米粒介导livin与survivin小干扰RNA杀伤结肠癌细胞

　　近日，中南大学肝胆肠外科研究中心研究人员发表论文，旨在以mPEG-CS纳米粒作为livin基因和survivin基因的干扰RNA的载体，转染人结肠癌细胞HT-29，观察livin和survivin沉默对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响。研究指出，mPEG-CS纳米粒介导的livin和survivin双基因干扰能有效降低人结肠癌HT-29细胞中livin和survivin基因的表达，抑制HT-29细胞的增殖，并促进HT-29细胞的凋亡，其效果强于单独干扰livin或survivin基因。双基因联合干扰具有协同增强效应。该文发表在2012年第18期《中国现代医学杂志》上。

　　利用离子交联法，制备粒径约60nm的mPEG-CS纳米粒。利用静电吸附法，以纳米粒混悬液与基因溶液配比为3∶1的条件，构建mPEG-CS-livin shRNA纳米粒、mPEG-CS-survivin shRNA纳米粒以及mPEG-CS-（livin shRNA+surviving shRNA）纳米粒，之后，分别转染进人结肠癌HT-29细胞中。利用RT-PCR和Western Blot分别检测livin、survivin基因和蛋白的表达变化；利用MTT法检测livin、survivin基因表达下调对HT-29细胞增殖的抑制效率；利用Hoechst染色检测livin、survivin基因沉默对HT-29细胞凋亡的诱导。

　　各干扰组均能在mRNA和蛋白水平上有效抑制HT-29细胞中livin、survivin的表达。MTT和Hoechst染色结果显示，联合干扰livin和survivin基因可有效抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖，并促进细胞凋亡，且效果均强于单独干扰livin或sur-vivin基因。