雷帕霉素对莱菔硫烷诱导人结肠癌细胞UGT1A同工酶及CYP3A4表达的调控

　　近日，山东大学齐鲁医院老年消化内科研究人员发表论文，旨在以人结肠癌Caco-2细胞为模型，观察雷帕霉素（Rapa）对莱菔硫烷（SFN）诱导葡萄糖醛酸转移酶（UGT）1A1、UGT1A8、UGT1A10及细胞色素P450（CYP）3A4的调控，探讨Rapa对SFN化学预防效应的影响。研究指出，Rapa可协同增强SFN对Caco-2细胞自噬效应的诱导；Rapa可能通过上调Nrf2信号通路，使SFN诱导UGT1A1、UGT1A8和UGT1A10表达增加，进而增强SFN的化学预防效应，同时未影响SFN对CYP3A4转录抑制效应。该文发表在2013年第11期《上海交通大学学报医学版》杂志上。

　　实验分为对照组、10 nmol/L Rapa组、25μmol/L SFN组和25μmol/L SFN+10 nmol/L Rapa组。透射电镜观察细胞超微结构，Western blotting法测定微管相关蛋白1轻链3（LC3）和核因子E2 P45相关因子2（Nrf2）的表达，实时荧光定量PCR法测定UGT1A1、UGT1A8、UGT1A10及CYP3A4 mRNA的表达，免疫荧光法观察Nrf2的核内转位。

　　透射电镜观察到10 nmol/L Rapa组、25μmol/L SFN组和25μmol/L SFN+10 nmol/L Rapa组细胞中自噬体及自噬溶酶体的形成；与对照组相比，25μmol/L SFN组、25μmol/L SFN+10 nmol/L Rapa组可诱导LC3-II蛋白及UGT1A1、UGT1A8、UGT1A10 mRNA的表达增加，诱导Nrf2蛋白的表达及核内转位增强，且25μmol/L SFN+10 nmol/L Rapa组的作用更显著；而10 nmol/L Rapa组、25μmol/L SFN组和25μmol/L SFN+10 nmol/L Rapa组中，CYP3A4 mRNA的表达均受到抑制。