慢性化脓性中耳炎大鼠中耳黏膜的细菌生物膜形成特点及意义

　　近日，华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科研究人员发表论文，旨在建立慢性化脓性中耳炎大鼠模型，观察细菌生物膜在模型动物中耳黏膜的形成特点，探讨其在慢性化脓性中耳炎发病机制中的作用。研究指出，①接种菌液后1～5d是细菌黏附、聚集阶段，6d后细菌生物膜三维结构初步形成，10d左右达到成熟稳定状态；②随着中耳黏膜细菌生物膜的生长与成熟，中耳炎炎症也在逐渐加重，提示中耳炎炎症感染的严重程度与细菌生物膜的成熟程度密切相关。该文发表在2013年第01期《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》上。

　　将28只大鼠分为6个实验组（分别为接种菌液后1、3、6、10、15、21d组）和1个对照组，每组4只。所有实验组大鼠用浓度为1×106 cfu/ml的铜绿假单胞菌菌液经鼓膜穿刺途径感染双侧中耳腔。分别在接种细菌后1、3、6、10、15、21d，将相应实验组的4只大鼠麻醉，用电耳镜观察双侧鼓膜，对炎症的严重程度进行评分；大鼠处死后取双侧听泡，左侧听泡制备成扫描电镜标本并观察中耳黏膜细菌生物膜形态，右侧听泡采用激光共聚焦显微镜观察中耳黏膜细菌生物膜形态。对照组在第0天即处死取材。

　　①用扫描电镜和激光共聚焦显微镜观察大鼠中耳黏膜标本，均在接种细菌6d左右观察到符合各自判定标准的细菌生物膜形成，到10d后形态更加典型，并在3周内形态保持稳定；②用电耳镜观察大鼠鼓膜，发现炎症感染程度在接种菌液10d内逐渐加重，10d后达到高峰并持续至第3周。1d组、10d组与6d组鼓膜评分比较，差异有统计学意义（P<0.05、P<0.01）。