RNAi沉默PELPI/MNAR基因对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的作用

　　近日，中山大学附属第三医院妇科研究人员发表论文，旨在构建脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1（PELP1）基因慢病毒表达载体，研究沉默PELP1/雌激素受体非基因组活性辅助调节因子（PELP1/MNAR）基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和周期的作用及机制。研究指出，在子宫内膜癌细胞中沉默PELP1/MNAR的表达能能抑制细胞生长、使细胞阻滞在G1期，下调ER靶基因蛋白表达，PELP1/MNAR有望成为子宫内膜癌治疗的潜在靶点。该文发表在2013年第06期《中山大学学报（医学科学版）》杂志上。

　　构建合成靶向PELP1/MNAR RNAi慢病毒表达载体，并转染子宫内膜癌Ishikawa细胞，Real-time PCR和western blot检测PELP1/MNAR mRNA和蛋白水平的表达。使用普通培养基和加入E2的培养基培养各组细胞，MTT检测各组细胞增殖情况；流式细胞仪检测细胞生长周期情况；Western blot检测ER下游靶基因c-fos，cyclin D1的蛋白表达水平。

　　成功构建合成靶向PELP1/MNAR RNAi慢病毒表达载体，转染子宫内膜癌Ishikawa细胞，转染后PELP1/MNAR mRNA的表达和蛋白的表达分别下降86%和65%（P<0.05）。转染后Ishikawa细胞与对照组相比增殖抑制（P<0.05），细胞周期G0/G1期细胞比例增加，S期细胞比例减少（P<0.05）。加入雌激素后，三组细胞的生长速度加快，细胞S期的比例增加，转染组增殖抑制明显（P<0.05），S期比例降低（P<0.05）。转染组ER下游基因c-fos、cyclin-D1蛋白水平均显著降低（P<0.05）。