miR-205对PEG3在子宫内膜癌细胞系中的靶向降调作用
近日,山东大学齐鲁医院妇产科研究人员发表论文,旨在探讨子宫内膜癌细胞系中miR-205对父性表达基因3(PEG3)蛋白的作用。研究指出,MiR-205作用于PEG3基因的3’UTR端,在转录后水平抑制PEG3的表达,提示PEG3是miR-205的直接靶基因。该文发表在2013年第04期《山东大学学报(医学版)》杂志上。
免疫组化方法确定PEG3蛋白在正常子宫内膜与高、中、低分化子宫内膜癌组织中表达的差异。RT-PCR筛选出miR-205较正常子宫内膜细胞株表达量高的高、中、低分化子宫内膜癌细胞系,CCK-8及流式细胞学实验检测上调miR-205前后细胞增殖及凋亡;Western blot、RT-PCR和双荧光素酶报告基因分析等实验方法验证miR-205对PEG3是否有直接的靶抑制作用。
PEG3蛋白在正常子宫内膜组织中表达明显高于高、中、低分化子宫内膜癌组织。miR-205在高、中、低分化子宫内膜癌细胞系中上调后,细胞增殖促进,凋亡抑制;Western blot结果示PEG3蛋白含量降低,PEG3抑制的WNT通路中的两个关键蛋白β-catenin及c-myc也相应的表达量上调,而RT-PCR结果显示PEG3mRNA含量变化差异无统计学意义;双荧光素酶报告基因分析结果显示miR-205作用于PEG3基因的3’UTR端。
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