用探针熔解曲线法检测急性髓细胞白血病 c-kit 基因突变

　　近日，福建医科大学协和临床医学院研究人员发表论文，旨在用改良的杂交探针结合溶解曲线新方法检测急性髓性白血病c-kit基因17号外显子上基因突变。研究指出，新方法具有方便快速、灵敏度高、特异性好等特点，可用于CBF-AML患者的个体化诊断和治疗。该文发表在《中华临床医师杂志》2013年第9期上。

　　利用Primer Premier v5.00、Tm Utility v1.3等软件设计引物探针，两个阶段探针分别针对D816、N820和N822等突变热点。取患者DNA样品5μl进行PCR扩增及熔解曲线分析，PCR扩增产物进行测序分析并与熔解曲线分析方法进行比较。

　　阳性质粒灵敏度试验的结果显示， N820 G的灵敏度为10％，其余突变灵敏度均能达到5％。12例CBF-AML标本中，5例检测为阳性，突变率为41.7％，测序结果与测序检测结果相符。