THP-1细胞系白血病干细胞的检测、分选及鉴定

　　近日，郑州大学第一附属医院儿科研究人员发表论文，旨在探讨人急性单核细胞白血病THP-1细胞株中是否存在白血病干细胞（LSCs），并比较该LSCs与非LSCs亚群的生物学特性。研究指出，THP-1细胞株中存在LSCs，这群细胞比例低，大部分处于静止期，具有干细胞生物学活性及体内致瘤性，可能与白血病的耐药和复发有关。该文发表在2013年第02期《郑州大学学报（医学版）》杂志上。

　　应用流式细胞术测定THP-1细胞中LSCs（CD34+CD38-细胞）的比例并分析LSCs与非LSCs的细胞周期。实时荧光定量PCR检测2种细胞中ABCG2、ABCB1耐药基因和Bcl-2、Bax凋亡基因的表达。将分选的LSCs移植到NOD/SCID小鼠，观察其致瘤能力。

　　THP-1细胞中存在CD34+CD38-的LSCs，比例为（0.12±0.06）%。大部分的LSCs处于细胞静止期，G0/G1期比例达（94.03±1.61）%；非LSCs增殖期细胞比例相对较高，S/G2/M期细胞比例为（56.58±1.59）%。实时荧光定量PCR结果显示：LSCs中ABCG2、ABCB1及Bcl-2的表达水平高于非LSCs（t=20.725、22.179、13.707，P<0.001），Bax在两亚群的表达无差异（t=1.635，P=0.071），但是LSCsBcl-2/Bax比值高于非LSCs（t=10.781，P<0.001）。1×103数量的LSCs可在4周后形成典型的NOD/SCID小鼠白血病浸润模型，未分选的THP-1细胞至少需要1×106才能成瘤。