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黏着斑激酶基因对REH白血病细胞生物学特性的影响

  近日,中山大学孙逸仙纪念医院儿科研究人员发表论文,旨在研究黏着斑激酶(FAK)基因对白血病细胞生物学特性的影响。研究指出,FAK基因沉默能诱导白血病细胞凋亡,并降低白血病细胞迁移及归巢能力,并抑制白血病生成,提示分子靶向FAK基因有望成为白血病治疗的新策略。该文发表在2013年第01期《中山大学学报(医学科学版)》杂志上。

  构建FAK shRNA慢病毒载体,转染至急性淋巴白血病细胞株REH,同时建立空白载体对照细胞株。通过蛋白质印迹方法检测FAK蛋白表达情况,予荧光染料Annexin V标记细胞观察细胞凋亡情况。体外应用Transwell培养体系,观察白血病细胞在细胞因子SDF-1作用下的迁移能力。将REH细胞予绿色荧光CFSE进行标记,经尾静脉注射到SCID小鼠,观察白血病细胞在动物体内归巢及白血病生成情况。

  FAK shRNA慢病毒载体在REH白血病细胞蛋白水平的抑制率为75%。凋亡实验中,空白对照组和FAK基因沉默组Annexin V+细胞百分比分别为(2.19±0.36)%和(6.48±0.58))%。体外迁移实验发现空白对照组与FAK基因沉默组的细胞迁移百分比分别为(50.3±7.22)%和(7.6±3.15)%;动物体内归巢实验发现FAK基因沉默的细胞归巢于骨髓能力明显降低。白血病动物实验发现空白载体对照组小鼠生存时间是40~47 d,而FAK基因沉默组小鼠生存时间是72~80 d。白血病细胞输注后第45天,空白载体对照组与FAK基因沉默组小鼠骨髓中白血病细胞所占百分比分别为(65.5±8.20)%和(9.60±3.65)%。