B细胞淋巴瘤/白血病基因2在颅脑外伤后抗神经元凋亡作用

　　近日，同济大学附属东方医院神经外科研究人员发表论文，旨在通过研究B细胞淋巴瘤/白血病基因2（Bcl-2）高表达转基因小鼠和对照小鼠颅脑打击后神经元凋亡的差异，探寻Bcl-2抗凋亡及减轻颅脑损伤的作用。研究指出，Bcl-2蛋白是中枢神经系统内在的重要的抗凋亡因子，高表达Bcl-2能够抑制颅脑损伤后神经元的凋亡，从而减轻大脑的损害。该文发表在2012年第07期《上海医学》杂志上。

　　将构建的Bcl-2质粒转入C57BL/6J×CBA杂交小鼠的受精卵，培育得到携带Bcl-2的小鼠。Bcl-2转基因小鼠9只作为实验鼠，采用随机数字法分为实验1 d组、实验7 d组和实验14 d组，每组3只。同窝非转基因小鼠9只作为对照鼠，采用随机数字法分为对照1 d组、对照7 d组和对照14 d组，每组3只。采用液压打击法中侧方液压打击的方法，以中等打击力致小鼠中等颅脑外伤。余下3只同窝非转基因小鼠为假手术组，仅打开椎板，暴露硬脊膜，不予打击。分别于术后1、7、14 d处死小鼠，取脑组织切片行苏木精-伊红（H-E）染色，观察神经元变化；采用原位末端标记法（TUNEL）染色计数TUNEL标记的阳性细胞数即凋亡神经元，并计算TUNEL染色切片的积分光密度（IOD）值。

　　经聚合酶链反应及Western印迹法检测证明所培育的转基因小鼠为Bcl-2高表达的小鼠。假手术组小鼠脑细胞未见明显变化。实验鼠和对照鼠的脑组织都有出血，结构被破坏，实验鼠的损伤肿胀及出现核固缩或解离的神经元数量少于对照鼠。假手术组小鼠的脑组织未见明显的凋亡神经元细胞。实验鼠和对照鼠的脑组织标本可见TUNEL染色阳性细胞，随时间的推移逐渐增多，在损伤后7 d达到高峰，然后稳定并逐渐减少。实验1 d组、实验7 d组、实验14 d组小鼠的每个光学显微镜高倍镜视野内的TUNEL阳性神经元数（P值分别为0.042、0.039、0.033）和TUNEL染色切片的IOD值（P值均为0.000）均分别显著少于对照1 d组、对照7 d组、对照14 d组。