siRNA沉默PTTG表达对子宫内膜癌细胞生长及放疗敏感性的影响

　　近日，南京医科大学第一附属医院妇产科研究人员发表论文，旨在观察垂体瘤转化基因（pituitary tumor transforming gene，PTTG）小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）干扰对子宫内膜癌细胞HEC-1A的生长及放疗敏感性的影响。研究指出，成功构建了靶向抑制PTTG基因的siRNA干扰载体，PTTG siRNA可抑制子宫内膜癌细胞HEC-1A的增殖，诱导其凋亡，增强其对放疗的敏感性。该文发表在2012年第11期《南京医科大学学报(自然科学版)》杂志上。

　　构建PTTG干扰载体（pSilencer3.0-Hl-PTTG-siRNA），利用脂质体将其转染至HEC-1A细胞，Western blot检测PTTG蛋白表达水平，筛选干扰效果最强的序列。另用2Gy X线作用于转染PTTGsiRNA的HEC-1A细胞，同时设不予任何处理的对照组、只转染PTTGsiRNA的处理组、只用X线处理的放疗组。MTT检测细胞生长状况，流式细胞仪检测细胞凋亡。

　　成功构建了靶向抑制PTTG基因的siRNA干扰载体。MTT实验结果显示，与对照组相比，放疗组、PTTGsiRNA转染组、PTTGsiRNA联合放疗组细胞增殖抑制率分别为（31.39±5.62）%、（38.37±5.48）%、（54.65±6.27）%。流式细胞仪检测显示细胞凋亡率在对照组、放疗组、PTTGsiRNA转染组、PTTGsiRNA转染联合放疗组中分别为（6.53±0.80）%、（32.72±4.56）%、（38.96±4.37）%、（64.76±6.53）%。PTTGsiRNA转染组或放疗组与对照组比较，细胞凋亡率及细胞增殖抑制率差异均有统计学意义（P<0.01），而PTTGsiRNA转染联合放疗组的凋亡率及细胞增殖抑制率较PTTGsiRNA转染组或放疗组明显增高，组间比较差异均有统计学意义（P<0.01）。