干扰核仁磷酸蛋白对人白血病OCI/AML3细胞凋亡的影响及其机制

　　近期，重庆医科大学检验医学院血液教研室、临床检验诊断学教育部重点实验室、重庆市重点实验室研究人员发表论文，旨在探讨抑制核仁磷酸蛋白（nucleophosmin，NPM）1基因对人白血病细胞凋亡的影响及相关机制。研究指出，NPM1突变基因在白血病细胞抗凋亡特性中发挥重要作用，潜在的分子机制可能与ERK信号分子及Bax/Bcl-2表达有关。该文发表在2014年第11期《重庆医科大学学报》杂志上。

　　将空载慢病毒p GIPZ和NPM干扰慢病毒sh NPM分别感染携带NPM1突变的OCI/AML3白血病细胞株以及对照白血病细胞株HL60。采用q RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学法检测白血病细胞的sh NPM组以及Mock和p GIPZ组细胞及NPM1 A型突变（NPM1-m A）基因和蛋白的表达，流式细胞仪和瑞氏染色法观察OCI/AML3的sh NPM组以及Mock和p GIPZ组细胞凋亡情况，q RT-PCR和Western blot检测OCI/AML3的sh NPM组以及Mock和p GIPZ组凋亡相关蛋白（Bax/Bcl-2）和p-ERK信号分子表达；流式细胞仪检测丝裂原活化蛋白激酶/胞外信号调节激酶信号通路抑制剂（PD98059）处理后OCI/AML3的sh NPM组以及Mock和p GIPZ组细胞凋亡率的改变。

　　干扰NPM1明显抑制OCI/AML3细胞株NPM1-m A的m RNA水平（F=20.078；P=0.000，PMock vs.sh NPM=0.001，Pp GIPZ vs.sh NPM=0.003，PMock vs.p GIPZ=0.333）和蛋白水平，伴有胞质NPM突变蛋白表达明显减弱；干扰NPM1能明显上调OCI/AML3细胞凋亡率（F=25.236，P=0.000，PMock vs.sh NPM=0.001，Pp GIPZ vs.sh NPM=0.001，PMock vs.p GIPZ=0.729），同时光镜下观察到干扰组细胞出现凋亡小体等凋亡形态学特征。此外，干扰NPM1可上调OCI/AML3细胞中促凋亡分子Bax的蛋白和m RNA表达（F=7.649，P=0.000；PMock vs.sh NPM=0.015，Pp GIPZ vs.sh NPM=0.015，PMock vs.p GIPZ=0.984）、下调抗凋亡分子Bcl-2的蛋白和m RNA表达（F=5.190，P=0.000；PMock vs.sh NPM=0.034，Pp GIPZ vs.sh NPM=0.029，PMock vs.p GIPZ=0.909）；干扰NPM1能明显下调p-ERK的表达，PD98059抑制剂阻断MAPK通路可促进OCI/AML3细胞凋亡（F=25.643，P=0.007）。