免疫抑制性受体LILRB2对白血病细胞系增殖和凋亡的影响

　　近日，上海交通大学基础医学院细胞分化与凋亡教育部重点实验室研究人员发表论文，旨在探讨免疫抑制性受体—白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员2（LILRB2）在人白血病细胞系中的表达、功能和相关机制，为白血病的靶向治疗提供新的方向。研究指出，免疫抑制性受体LILRB2可表达在多种白血病细胞系，抑制LILRB2的表达可引起THP1细胞中SHP1和p-SHP1的显著下调并导致细胞大量凋亡，揭示SHP1可能对白血病的演变具有正向调控作用。该文发表在2014年第07期《上海交通大学学报医学版》杂志上。

　　采用流式细胞术和Western blotting等方法确定LILRB2在THP1、U937、K562等白血病细胞系中的表达情况；以LILRB2高表达的THP1细胞为研究对象，利用特异性靶向LILRB2的shRNA慢病毒载体（带GFP标记）包装病毒并感染THP1细胞，使用流式细胞分选技术获得GFP+的稳定表达细胞株，并分别在mRNA水平和蛋白水平检测shRNA干扰效率，同时监测LILRB2敲除后不同时间点细胞增殖、凋亡等细胞命运的变化，分析LILRB2敲除后其下游调控信号改变等相关分子机制。

　　3株细胞系均表达LILRB2，其中又以THP1的表达最高；通过Real-Time PCR及Western blotting方法表明所构建的4个shRNA慢病毒干扰质粒中，shLILRB2-717及shLILRB2-1312能显著下调LILRB2的表达；抑制LILRB2在THP1细胞中的表达可导致细胞增殖明显减缓并出现大量坏死细胞。流式细胞术分析显示：shLILRB2-717和shLILRB2-1312组细胞早期凋亡率分别为（7.90±1.61）%和（24.80±1.32）%，显著高于对照组（Scramble组）的（3.96±0.64）%（P<0.05）；两组细胞的晚期凋亡率分别为（13.80±0.98）%和（23.60±1.03）%，均显著高于Scramble组的（10.80±0.48）%（P<0.05）；LILRB2敲除可导致SHP1和磷酸化SHP1（p-SHP1）表达的显著下调，提示LILRB2可能通过SHP1调控白血病细胞系的增殖和凋亡。