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慢性粒细胞白血病BCR-ABL融合基因实时定量检测平台的建立

  近日,大连医科大学附属第二医院血液科研究人员发表论文,旨在建立慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)患者BCR-ABL融合基因检测及微小残留病变实时定量监测的诊断平台。研究指出,自行构建BCR-ABL质粒为标准品,运用RQ-PCR实时监测BCR-ABL融合基因的表达变化,敏感性好,稳定性高,对临床检验具有普遍意义。该文发表在2014年第01期《大连医科大学学报》杂志上。

  依据GenBank中编码P210蛋白的融合基因M(b2a2,b3a3)及ABL的基因序列,分别设计引物及Taqman探针,以BCR-ABL阳性的CML患者cDNA为模板,通过PCR扩增出587 bp的基因片段,连入pMD 18-T载体,制备成标准品并绘制标准曲线,运用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)技术监测BCR-ABL转录水平的变化。

  成功构建BCR-ABL标准品。应用RQ-PCR探针法,以ABL为内参,对CML患者进行BCR-ABL融合基因的检测,得到比较稳定的定量数据,与定性结果一致。