腺病毒介导的PML(NLS-)过表达对白血病NB4细胞增殖和凋亡的影响

　　近日，重庆医科大学附属永川医院中心实验室研究人员发表论文，旨在利用腺病毒介导PML(NLS-)的过表达，探讨PML(NLS-)对NB4白血病细胞增殖凋亡的影响。研究指出，PML(NLS-)过表达能够促进白血病NB4细胞的体外增殖能力，抑制其凋亡。该文发表在《基础医学与临床》2014年第34卷第10期上。

　　重组腺病毒质粒Ad-PML(NLS-)经Pac Ⅰ酶切线性化后转染AD293细胞，获得重组腺病毒Ad-PML(NLS-)，经4轮扩增后，测定重组腺病毒滴度；重组腺病毒感染NB4细胞，荧光显微成像和流式细胞术检测感染效率，RT-PCR法和Western blot法检测NB4细胞中PML(NLS-)的转录及表达水平，MTT实验观察细胞增殖，流式细胞术分析细胞周期及凋亡。

　　重组腺病毒质粒Ad-PML(NLS-)经酶切和测序鉴定正确，经4轮扩增病毒滴度为1 ×1010pfu/mL；重组腺病毒Ad-PML(NLS-)感染NB4细胞效率达75％，PML(NLS-)基因可在NB4细胞中高效表达；NB4细胞增殖活力明显高于未感染组和空病毒载体感染组(P＜0.05)，S期细胞比例明显增高(P＜0.05)，G2期细胞比例明显减少(P＜0.05)；实验组细胞凋亡率明显低于空病毒感染组(P＜0.05)。