节点文献大鼠Thy-1肾炎增殖病变及sublytic C5b-9致其肾小球系膜细胞增生的实验研究

　　近日，南京医科大学微生物与免疫学系研究人员发表论文，旨在检查大鼠Thy-1肾炎（Thy-1 nephritis，Thy-1N）肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cell，GMC）的增生病变及亚溶解型（sublytic）C5b-9复合物在GMC增殖中的作用。研究指出，大鼠Thy-1N肾小球病变存在早期增殖和继发增生的病理改变，而GMC的早期增殖可能与sublytic C5b-9作用有关。该文发表在2012年第10期《南京医科大学学报(自然科学版)》杂志上。

　　复制大鼠Thy-1N模型，分别于注射Thy-1抗体后18 h、3 d和7 d时，取肾组织，用real-time PCR和Western blot方法检查其肾组织中细胞增殖指标，即细胞周期蛋白D2（cyclin D2）和增殖细胞核抗原（proliferative cell nuclear antigen，PCNA）的mRNA丰度及蛋白表达水平。用免疫荧光观察肾小球中C5b-9复合物的沉积。同时，使用BrdU掺入法、光镜及电镜观察大鼠肾小球细胞的增殖情况。此外，体外培养大鼠GMC，进行不同分组处理后再给予sublytic C5b-9刺激，用3H-胸腺嘧啶核苷酸掺入法（3H-thymidine incorporation，3H-TdR）检查GMC的增殖情况。

　　大鼠Thy-1N病变18 h，肾组织中cyclin D2、PCNA表达和肾内BrdU阳性细胞数均开始升高，实验3 d和7 d，其表达进一步提高。同时肾小球内可见C5b-9复合物沉积，部分C5b-9包绕的肾细胞形态完好。另形态学观察还发现，实验18 h，部分GMC溶解坏死，而实验3 d，GMC数量明显增多，7 d增加更为显著。体外实验中，大鼠GMC在sublytic C5b-9刺激后18 h，其细胞增殖水平显著增高，而用sublytic C5b-9刺激GMC产生的培养上清处理正常的GMC后，亦能轻度刺激GMC增殖。