HBx基因通过调节凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值促进人肾小管上皮细胞凋亡

　　近日，中国医科大学附属盛京医院肾内科研究人员发表论文，旨在探讨HBV x基因（HBx）对人肾小管上皮细胞株（HK-2）增殖和凋亡的影响及机制。研究指出，HBx基因可抑制HK-2细胞增殖并通过提高凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值诱导其凋亡。该文发表在2014年第01期《中国医科大学学报》杂志上。

　　采用脂质体转染法，将质粒pCDNA3.1（+）HBx转染至HK-2细胞株。细胞实验分5组，对照组、转染空质粒pCDNA3.1（+）组、转染pCDNA3.1（+）HBx24 h组、转染pCDNA3.1（+）HBx 48 h组、转染pCDNA3.1（+）HBx 72 h组。CCK8方法检测HBx对各组细胞增殖抑制率的影响；用透射电镜及AV/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率。应用免疫细胞化学及免疫印迹检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2水平。

　　经酶切鉴定及测序结果显示pCDNA3.1-HBx构建成功。与对照组相比，空质粒组细胞存活率及凋亡率无明显差异，凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值无明显差异（P>0.05）。转染HBx基因24 h后，细胞增殖明显受抑，凋亡率显著增加，Bax/Bcl-2比值开始增高。至72 h，细胞增殖抑制率最高达到（35.27±1.10）%，细胞凋亡率达到最高为（23.80±2.16）%，Bax/Bcl-2比值显著增高。与对照组及其他各组比较，具有显著性差异（P<0.05）。