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敲低MSX2对胰腺癌PANC-1细胞上皮-间充质转化的影响

  近期,蚌埠医学院第一附属医院肝胆外科研究人员发表论文,旨在研究MSX2基因在胰腺癌PANC-1细胞的上皮-间充质转化(EMT)/间充质-上皮转化(MET)转变中的作用。研究指出,敲低MSX2可抑制胰腺癌PANC1细胞的增殖、侵袭转移能力,并且上皮标志分子E-cadherin表达升高,间质标志分子Vimentin表达降低,有发生MET的趋势,MSX2可能通过twist、snail发挥其抑制作用。该文发表在2015年第02期《南方医科大学学报》杂志上。

  通过脂质体2000将含有MSX2干扰序列的质粒(共3种,分别命名为sh MSX2-1、sh MSX2-2和sh MSX2-3,转染空质粒的阴性对照组NC)转染PANC-1细胞,利用Real-time RT-PCR、Western blot等技术检测MSX2在基因和蛋白水平的表达,检测干扰效率,并选取干扰效率最高的一组用于后续试验;进而检测EMT相关上皮标志分子E-cadherin、间质标志分子Vimentin在基因和蛋白水平的表达变化;采用CCK-8法检测干扰前后细胞的增殖能力变化,Transwell和划痕试验比较细胞的侵袭转移能力变化。

  3组干扰质粒中sh MSX2-1的干扰效率最高,CCK-8试验结果显示敲低MSX2可明显抑制PANC-1细胞增殖能力,与对照组相比差异有显著性(P<0.05);敲低MSX2可明显抑制PANC-1细胞的侵袭转移,差异有统计学意义(P<0.05);EMT相关分子Ecadherin表达升高,而Vimentin表达降低,且与对照组相比均有统计学意义(P<0.05);倒置显微镜下观察敲低MSX2后细胞形态由松散的长梭形变成紧密连接的椭圆形。RT-PCR发现敲低MSX2后转录因子twist和snail表达降低(P<0.05),而slug和zeb1表达变化无差异(P>0.05)。