双胰腺癌相关抗原RNA转染树突细胞诱导特异性抗癌免疫反应的实验研究

　　近日，沈阳军区总医院消化科研究人员发表论文，旨在研究人胰腺癌MUC4与Survivin mRNA联合转染树突细胞（DC）诱导的特异性抗肿瘤免疫反应，为构建负载多抗原表位DC疫苗治疗胰腺癌提供实验依据。研究指出，MUC4与Survivin mRNA联合转染的DCs可较单胰腺癌相关抗原负载DCs诱导出更加显著的特异性CTL抗肿瘤免疫。该文发表在2014年第01《现代消化及介入诊疗》杂志上。

　　自胰腺癌患者外周血单核细胞中分离、培养DCs。使用体外转录和胰腺癌PCR技术扩增MUC4和Survivin mRNA后用电穿孔法将其联合转染DC。采用Western blot技术检测DCs中MUC4和Survivin的表达。用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测转染前后DCs存活率变化；使用IFN-γ酶联免疫法检测MUC4 mRNA与Survivin mRNA联合转染后DC诱导的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的活化反应。采用51Cr标准细胞毒实验检测转染MUC4和Survivin mRNA后DCs诱导的特异性CTL对体外胰腺癌细胞的杀伤作用。

　　MUC4与Survivin mRNA联合转染后72 h DCs中两者的相对表达量低于其分别转染。顺序转染后96 h DCs存活率降至50.2%，低于MUC4 mRNA与Survivin mRNA分别转染时DC 80%的存活率（P<0.05）。MUC4和Survivin mRNA联合转染DC诱导的特异性CTL 24 h IFN-γ释放量达（33.84±3.51）U/mL，高于MUC4与Survivin mRNA分别转染DC诱导的CTL IFN-γ释放水平[（21.87±4.12）U/mL和（16.61±2.09）U/mL，P<0.05]。DCs经MUC4 mRNA与Survivin mRNA联合转染后，可有效诱导HLA-A2+/MUC4+/Survivin+特异性CTL免疫反应，对体外培养的胰腺癌细胞具有显著的杀伤作用。