端粒酶逆转录酶小干扰RNA对胰腺癌Capan-2细胞抑制作用的实验研究

　　近日，上海市第七人民医院研究人员发表论文，旨在探讨RNA干扰（RNAi）对胰腺癌Capan-2细胞人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因的抑制效应。研究指出，靶向hTERT的RNAi能明显抑制Capan-2细胞的增殖，hTERT可作为胰腺癌基因治疗的靶点。该文发表在2014年第06期《现代中西医结合杂志》上。

　　化学合成靶向于hTERT基因的4个小分子干扰RNA（siRNA）序列，用阳离子脂质体为载体转染Capan-2细胞，分为siRNA1～SinRNA 4、siRNA阴性对照和空白对照6组。通过RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测胰腺癌细胞转染后细胞hTERT mRNA和蛋白水平，并用MTS法检测细胞生长增殖。

　　siRNA1～siRNA 4组hTERT mRNA相对表达量分别为0.51±0.22，0.56±0.19，0.44±0.13和0.89±0.21，端粒酶相对活性分别为0.60±0.15，0.63±0.16，0.17±0.12和0.72±0.16，hTERT蛋白相对表达量分别为0.47±0.21，0.52±0.19，0.10±0.11和0.84±0.15，其中siRNA1～siRNA3 3组的hTERT mRNA表达量、端粒酶活性和蛋白表达量与空白对照组比较有显著性差异（P均<0.05）。siRNA1～siRNA44组Capan-2细胞在转染后48 h时的细胞增长平均抑制率分别为50%，54%，63%和18%。不同siRNA序列对Capan-2的转染效率不同，其中siRNA3组能显著下调hTERT mRNA和蛋白的表达水平，并能抑制端粒酶活性和促进Capan-2细胞凋亡，与空白对照组比较均有显著性差异（P均<0.01）。