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沉默CXCR4基因表达抑制胰腺癌增殖和侵袭的体外研究

  近日,西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科研究人员发表论文,旨在利用RNAi技术构建CXCR4 shRNA表达载体,观察CXCR4基因干扰后胰腺癌细胞增殖及侵袭能力的变化。研究指出,成功构建了针对胰腺癌细胞CXCR4的siRNA载体;CXCR4基因沉默能抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭和成瘤能力。该文发表在2012年第04期《第三军医大学学报》杂志上。

  在不同分化程度胰腺癌细胞株中筛选出CXCR4高表达胰腺癌细胞株,RNAi技术构建CXCR4 shRNA表达载体,转染胰腺癌CXCR4高表达细胞Miapaca-2并应用G418筛选出稳定表达株,Real-time PCR、Western blot实验观察RNAi对CXCR4基因的抑制效率;MTT实验检测CXCR4基因干扰后胰腺癌细胞增殖,应用Transwell侵袭小室观察CXCR4干扰对胰腺癌细胞侵袭转移力的影响。

  胰腺癌细胞株Miapaca-2 CXCR4表达异常增高,特异性CXCR4基因沉默能够在基因和蛋白水平稳定、高效、特异地抑制CXCR4的表达,抑制效率达70%以上。特异性CXCR4 shRNA能够抑制细胞生长,细胞达到对数生长期的时间延长(P<0.05)。Transwell实验证明CXCR4基因干扰后细胞侵袭能力减低(P<0.05),即使SDF-1的刺激也不能够使细胞侵袭能力增加。