人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达及对胰腺癌细胞增殖的抑制作用

　　近日，江苏大学基础医学与医学技术学院研究人员发表论文，旨在以人源抗TROP2抗体Fab基因为模板，构建人源抗TROP2全分子抗体IgG真核表达系统，观察人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌细胞增殖的抑制作用。研究指出，本研究成功构建了人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达系统，并证明此抗体可特异性识别胰腺癌细胞表面的TROP2蛋白，且对胰腺癌细胞的增殖有明显的抑制作用。该文发表在2014年第06期《南京医科大学学报(自然科学版)》杂志上。

　　分别扩增抗TROP2抗体的重链和轻链基因，构建人源抗TROP2全分子抗体IgG的重组表达载体pWS-anti-TROP2，转染CHO dhfr-细胞，加MTX筛选抗体表达量高的单克隆株，Protein G亲和柱纯化，获得人源抗TROP2全分子抗体IgG。SDS-PAGE、Western blot、ELISA、免疫荧光和流式细胞术等方法鉴定人源抗TROP2全分子抗体IgG并分析其免疫学活性。MTT法分析人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌细胞BxPC-3的增殖抑制作用。

　　成功构建了人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达系统，表达并纯化人源抗TROP2全分子抗体IgG。经鉴定，抗体的轻链与重链大小与预期一致，可与TROP2蛋白特异性结合，效价可达1∶6 400。MTT检测结果表明，人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌BxPC3细胞的增殖有明显的抑制作用，且呈时效、量效依赖关系。