EBV编码潜伏膜蛋白2A抗原表位的串联表达及其免疫原性分析

　　近日，南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科研究人员发表论文，旨在制备具有免疫原性的EB病毒潜伏膜蛋白2A（latent membrane protein 2A，LMP2A）的表位串联蛋白并分析其免疫学特性。研究指出，本研究制备的表位融合蛋白，具有天然抗原的免疫原性，可制备能特异性识别天然LMP2A分子的多克隆抗体，为利用表位融合蛋白筛选全人源基因工程抗体奠定了基础。该文发表在2013年第05期《南京医科大学学报（自然科学版）》杂志上。

　　用DNAstar软件分析LMP2A的抗原表位，将预测的免疫原性较强的两个表位通过基因合成串联在一起，克隆到原核表达载体pET28a中，经大肠杆菌BL21表达并纯化。制备的含LMP2A表位重组蛋白经SDS-PAGE、Western blot鉴定后，免疫小鼠制备多克隆抗体，以ELISA检测抗体的效价，免疫组织化学法检测该抗体对天然LMP2A的特异性。

　　通过原核表达与纯化，获得高纯度的表位融合蛋白，经小鼠免疫并制备效价高且特异性的小鼠抗LMP2A的多克隆抗体，该抗体可用于ELISA和免疫组织化学分析。