人源抗EB病毒潜伏膜蛋白1特异性基因工程抗体Fab的筛选与特性

　　近日，江苏省省级机关医院耳鼻咽喉-头颈外科研究人员发表论文，旨在应用噬菌体展示技术制备抗EB病毒编码的潜伏膜蛋白1（latert membrare protern 1，LMP1）特异性、高亲和力的全人抗体Fab片段。研究指出，从人源Fab抗体库中筛选的Fab抗体能够与鼻咽癌细胞表面LMP1分子特异性结合，为研制用于EBV相关肿瘤如鼻咽癌生物治疗的靶向药物，提供了候选分子。该文发表在2012年第12期《南京医科大学学报(自然科学版)》杂志上。

　　利用稳定转染表达LMP1的SUNE-1细胞及原核表达的LMP1胞外区蛋白作为抗原对大容量人源Fab抗体库进行差减筛选及固相筛选，经过5轮细胞筛选和3轮固相筛选，随机挑选30个克隆经酶联免疫吸附法鉴定，阳性克隆进行可溶性表达，用LMP1阳性表达的人鼻咽癌细胞株HNE2/LMP1鉴定抗LMP1抗体Fab的结合活性。

　　Western blot、免疫荧光结果显示，从大容量人源Fab抗体库中筛选出1株抗LMP1抗体Fab，细胞ELISA、荧光激活细胞分类术、免疫荧光分析、免疫组化检测结果显示Fab与人鼻咽癌细胞表面LMP1分子有较好的结合活性。