转录因子CTCF对人肝癌干细胞及细胞增殖的影响

　　近日，四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室研究人员发表论文，旨在探讨CCCTC结合因子（CTCF）蛋白对人肝癌细胞（HepG2）的

　　肿瘤干细胞的影响以及对HepG2和CNE1（鼻咽癌细胞系）细胞生存能力的影响。研究指出，CTCF可抑制人肝癌干细胞生成，对HepG2和CNE1细胞生长无明显影响。该文发表在2014年第02期《四川大学学报(医学版)》杂志上。

　　构建pEGFP-N1/CTCF、CTCFshRNA和GFPshRNA质粒，转染至HepG2和CNE1细胞后，以RT-PCR及Western blot检测CTCF mRNA和蛋白的表达。采用流式细胞术检测转染CTCF-shRNA质粒后48h的HepG2细胞中携带表面抗原CD90肿瘤干细胞的比例，以转染GFP-shRNA的HepG2细胞和野生型HepG2细胞为对照。采用MTT方法分别检测转染CTCF过表达重组质粒及CTCF-shRNA质粒后24、48、72hHepG2和CNE1细胞的生存能力。

　　pEGFP-N1/CTCF转染后增加HepG2和CNE1细胞中CTCF mRNA和蛋白的表达（与pEGFP-N1相比，P<0.05），CTCF-shRNA转染则降低表达（与GFP-shRNA相比，P<0.05）。流式细胞仪检测结果显示，CD90+细胞的检出率在转染CTCF-shRNA质粒细胞〔（1.733 0±0.417 7）%〕高于野生型HepG2细胞〔（0.575 0±0.062 9）%〕及转染对照GFP-shRNA质粒细胞〔（0.350 0±0.086 6）%〕（P<0.05）；MTT实验结果显示CTCF的表达改变对HepG2和CNE1细胞的生存能力的影响不明显（P>0.05）。