DNA损伤修复基因与人鼻咽癌细胞辐射耐受CNE-2R细胞的相关性研究

　　近期，西安交通大学医学部第二附属医院肿瘤科研究人员发表论文，旨在探讨射线诱导后DNA损伤修复相关基因在放射敏感性不同鼻咽癌细胞系CNE-2、CNE-2R的差异表达。研究指出，9MeV-β射线照射后CNE-2细胞DNA的损伤程度较CNE-2R细胞明显，CNE-2R细胞放射抗拒性与DNA损伤修复能力的基因差异表达相关。通过对筛选出的靶基因进行调控，有可能改变细胞的放射敏感性。该文发表在2015年第01期《西安交通大学学报（医学版）》杂志上。

　　中性彗星分析法检测细胞DNA的双链断链（DSB）；免疫荧光技术检测磷酸化组蛋白γH2AX焦点形成、射线照射后细胞放射性损伤的时间剂量效应及放射敏感性的变化；基因芯片（OHS-029）技术检测CNE-2及CNE-2R细胞2Gy照射前后的基因差异表达；Western blot方法验证二者的差异表达蛋白质。

　　4Gy的9MeV-β射线照射后2h，CNE-2R细胞与CNE-2细胞相比，细胞DNA损伤程度加重，且随时间的延长更为明显。荧光显微镜显示，2Gy的9MeV-β射线照射后6h，CNE-2各时间段细胞γH2AX阳性细胞率明显高于CNE-2R组。DNA损伤相关基因表达谱分析发现，CNE-2和CNE-2R细胞相比，差异表达的DNA损伤修复相关基因共37个，其中上调基因24个，下调13个，其中6个位点差异6倍以上，3个位点低于0.1的差异表达；Western blot结果显示，与CNE-2细胞相比，GADD45a、RRAD1在CNE-2R中的表达水平明显下调，而ERCC1及PRKDC蛋白质明显上调，与基因芯片的研究结果一致。