EB病毒潜伏膜蛋白LMP2A对人鼻咽癌细胞增殖与迁移特性的影响

　　近期，南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科研究人员发表论文，旨在制备重组慢病毒载体p LMP2A，并检测其在人鼻咽癌细胞CNE1的表达情况及潜伏膜蛋白2A（latent membrane protein 2A，LMP2A）对人鼻咽癌细胞CNE1增殖、迁移、侵袭的影响。研究指出，成功制备了慢病毒载体p LMP2A，包装的慢病毒能够成功感染人鼻咽癌细胞系CNE1，使LMP2A基因得以高表达，并发现LMP2A能够促进人鼻咽癌细胞株CNE1增殖、迁移、侵袭，为进一步探讨EB病毒在鼻咽癌中的发病机制及基因治疗奠定了基础。该文发表在2015年第04期《南京医科大学学报（自然科学版）》杂志上。

　　利用DNA重组技术将EB病毒编码的LMP2A基因克隆到慢病毒表达载体plv-GFP中，通过酶切、测序验证，将重组慢病毒载体p LMP2A与包装质粒pdelta-8.91、p VSVG共转染人胚肾上皮细胞株293T，包装重组慢病毒LV-LMP2A，并感染人鼻咽癌细胞CNE1，经单克隆筛选后，用RT-PCR、免疫荧光和Western blot检测LMP2A在人鼻咽癌细胞CNE1的表达，CCK8法检测LMP2A对人鼻咽癌细胞CNE1增殖的影响，划痕实验、Transwell侵袭实验检测LMP2A对人鼻咽癌细胞CNE1迁移和侵袭的影响。

　　酶切及测序结果表明，成功制备了重组慢病毒载体p LMP2A；RT-PCR、Western blot、免疫荧光结果显示筛选出的细胞克隆能高表达EBV-LMP2A，CCK8结果显示LMP2A能促进人鼻咽癌细胞CNE1增殖，划痕实验结果显示LMP2A能促进人鼻咽癌细胞CNE1迁移，Transwell侵袭实验结果显示LMP2A能提高人鼻咽癌细胞CNE1侵袭能力。