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反义角蛋白13慢病毒质粒对鼻咽癌细胞放射敏感性的影响

  近日,云南省第二人民医院耳鼻咽喉科研究人员发表论文,旨在探讨反义角蛋白13(Keratin-13,KRT13)慢病毒质粒对鼻咽癌HNE-1细胞放射敏感性的影响。研究指出,反义KRT13慢病毒质粒可降低鼻咽癌HNE-1的放疗敏感性。该文发表在2014年第02期《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》上。

  构建稳定表达反义KRT13基因的慢病毒质粒,并通过G418筛选出稳定转染该质粒的鼻咽癌HNE-1细胞。按数字随机法将细胞分为control(正常HNE-1细胞)组、lentivirus(转染慢病毒空载体)组和anti-KRT13(转染慢病毒质粒组)。并分别检测各组细胞中KPT13含量。同时采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化。在0、1、2、4、6、8 Gy 6个放射剂量点下,采用克隆形成实验分析转染反义KRT13基因对细胞的存活影响,并分别用单击多靶模型和线性二次模型拟合出细胞的剂量存活曲线,对比放射生物学参数D0、Dq、N值、α、β和SF2值,评价细胞放射敏感性的变化。

  转染慢病毒质粒组的HNE-1细胞D0、Dq、N和SF2值较其他两组均增加,α/β值减小,且差异具有统计学意义(P均<0.05);反义KRT13可以阻滞细胞于G2/M期,同时抑制细胞凋亡。