潜伏膜蛋白1基因真核表达载体的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达

　　近期，桂林医学院病理学教研室研究人员发表论文，旨在构建真核细胞中表达潜伏膜蛋白1（LMP1）基因的增强荧光表达载体，观察其在鼻咽癌细胞中的表达。研究指出，成功构建LMP1真核表达载体，并可在鼻咽癌CNE2细胞株中表达。该文发表在2014年第05期《蚌埠医学院学报》杂志上。

　　从鼻咽癌C15细胞中获取编码LMP1的cDNA片段，经双酶切亚克隆到pEGFP-C1质粒载体，构建pEGFP-C1-LMP1真核表达载体。重组质粒经双酶切和测序鉴定，利用脂质体介导的方法将pEGFP-C1-LMP1体外瞬时转染鼻咽癌CNE2细胞，激光共聚焦显微镜观察LMP1的表达及其细胞内定位。

　　重组载体经SalⅠ和BglⅡ双酶切后，行琼脂糖凝胶电泳，可见1条与理论预测值一致的目的条带。DNA序列鉴定证实插入片段与GenBank提供的序列一致。将pEGFP-C1-LMP1瞬时转染鼻咽癌细胞株CNE2后，LMP1基因表达产物定位于细胞膜和细胞质中。