DHPLC方法检测并定量线粒体DNA1555A>G异质性突变
近日,暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院研究人员发表论文,旨在建立一种可靠、灵敏的DHPLC方法检测并定量线粒体DNA 1555A>G异质性突变。研究指出,DHPLC可以作为一种可靠、灵敏的筛选异质性突变的方法,能够快速准确的对线粒体DNA 1555A>G异质性突变进行检测并定量。该文发表在2013年第03期《中华耳科学杂志》上。
采用克隆技术构建已知突变负荷的标准品,以此为实验材料,对影响DHPLC仪器检测准确性的主要因素进行探索和优化,建立最佳的DHPLC检测条件。收集氨基糖甙类药物性耳聋患者10例,听力正常的家属成员40例,使用DHPLC方法检测并定量其异质性水平,并与传统的检测方法PCR-RFLP和直接测序法进行对比验证。
获得已知突变负荷的标准品,建立了一套最优的DHPLC方法检测并定量1555A>G异质性突变。在10例患者中,DHPLC共检出6例异质性突变个体,而利用传统的检测方法只检出4例;此外,在经传统检测方法确认为野生型的40例对照中,采用DHPLC方法又检出2例低水平的异质性突变个体。
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